1、土样采集：取10cm左右深层土壤10g备用.
2、制备土壤稀释液：称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10－2的土壤悬液.然后进行十倍梯度稀释,依次制备 10－3、10－4、10－5
、10－6 、10－7 稀释度的土壤稀释液. 3、培养基平板制备：按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml.灭菌后分别倒3个平板.（高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚；马丁氏培养基倒平板前加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml 1万单位/ml链霉素）
4、接种：用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液,以无菌操作技术接种在平板上,涂布均匀.细菌选用10－4、10－5、10－6 三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌与霉菌选用10－2 、10－3、10－4 三个稀释度,分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基.（一个稀释度一个平板）
5、培养：细菌平板于37℃恒温培养1～2d,放线菌于30℃培养2～3d,霉菌于30℃培养3～5d ,观察.
6、计数：用稀释水样检测平板的菌落计数方法进行计数,报告细菌总数/(CFU·ml-1)
7、纯化：挑取典型菌落接种于相应平板,培养条件同上,培养纯化.
