不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳——蛋白质的分离

1.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)根据其有无浓缩效应,分为连续系统和不连续系统两大类,连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷和分子筛效应.不连续系统中由于缓冲液离子成分,pH,凝胶浓度及电位梯度的不连续性,带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应,分子筛效应,还具有浓缩效应,因而其分离条带清晰度及分辨率均较前者佳.
2.不连续系统中由于缓冲液离子成分,pH,凝胶浓度及电位梯度的不连续性.
3隔离空气,形成平整的界面.
4凝胶配制过程要迅速,催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶.注胶过程最好一次性完成,避免产生气泡.\x0b
5沸水中加热3分钟,去掉亚稳态聚合.