PCR仪的使用,以下的一些数据帮解释下

问题描述:

PCR仪的使用,以下的一些数据帮解释下
首先是 ①94℃→5min  这个目的是干嘛?            ②94℃→30s    这个目的是什么?            ③56℃→30s    这个目的是什么?            ④72℃→30s    这个目的又是什么?            (第二步到第四步要重复30次,这个目的是什么?)            ⑤72℃→3min   这个目的又是什么?            ⑥4℃→∞           这个目的又是什么?     以上是遗传学实验:利用分子标记对三系杂交水稻分型实验中PCR扩增环节,老师给出的步骤,不是很理解,希望高手给解释下     加入的酶是最适温度在72摄氏度的TaqE酶,最终需要得到和标记的目的基因应该是水稻细胞线粒体中的ORFHL79      但DNA是老师现成给的,所以不清楚是整个细胞所有DNA的混合物,还是已提纯的目的基因     不知道这对上面的分析是否会有影响,所以也提了一下      
1个回答 分类:生物 2014-11-16

问题解答:

我来补答
首先是 ①94℃→5min 这个目的是干嘛? DNA双链预变性,充分变成单链 ②94℃→30s 这个目的是什么? 变性,双变单 ③56℃→30s 这个目的是什么? 退火,引物结合 ④72℃→30s 这个目的又是什么? 引物沿着模板延伸 (第二步到第四步要重复30次,这个目的是什么?) 不同循环的扩增,1个 DNA双链变成2个DNA双链,以此下去进行扩增 ⑤72℃→3min 这个目的又是什么? 延伸完全,没延伸全长的延伸完全 ⑥4℃→∞ 这个目的又是什么? 保存样品而已
 
 
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