我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和EcoRI联用,怎么看酶切之后会不会发生移码问题呢?请多多指教!

问题描述:

我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和EcoRI联用,怎么看酶切之后会不会发生移码问题呢?请多多指教!
这是我用的真核表达质粒载体

还有就是,我的那个目的基因有自己的启动密码子和终止密码子,而载体质粒也有启动密码子和终止子,那我设计引物的时候是不是要把目的基因的终止子去掉呢?
1个回答 分类:语文 2014-10-05

问题解答:

我来补答
如果是目的基因里面没有XhoI 和EcoRI的酶切位点,引物设计好了,应该不会出现移码的问题.
再问: 可是我们老师告诉我说酶切之后,如果碱基不是3的倍数的话,就会发生移码,我就是不明白这数碱基是数质粒的,还是数我的目的基因呢?
再答: 数重组的质粒,插进去的目的基因序列转录出的mRNA的起始密码和终止密码应该是没问题的,看连完之后有没有移码问题。
再问: 请问是将目的基因克隆到载体之后,从目的基因的起始密码子数到载体的起始密码子吗?如果是3的倍数就不会发生移码了呀?
 
 
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