细胞按要求培养,抽RNA,反转录为cDNA.
有细胞计数,测RNA 浓度（分光光度计）等环节.
选择反应物,
待测样本：0hr,P4,L4,P12,L12,P24,L24,P36,L36 九种
阴性对照：即无模板对照,NTC
作为标准的样品：如果有必要做标准曲线的话,选择一种比较容易准确定量的DNA (如果是
进行绝对定量分析,则需要浓度完全已知的DNA 标准品——要求：能够被引物所扩增,比
如,其他种类细胞的cDNA,或,克隆有DNA 片段的质粒载体).
选择引物（基因）
endogenous control 使用的持家基因：GAPDH(甘油醛脱氢酶
转录水平待测的基因
因为每个反应管要做3 次重复以上,所以应该准备好充足量的 PCR 试剂,推荐——先混合
得到Master Mix,再分至各个反应管.
※标准曲线和待测样品其实应该在同一次real time PCR 中做.第一次做的话,试验的成分
更多些,所以,重复数应该大一些（4）,这样就不得不把标准曲线和待测样品分开了.等到
