求基因克隆的完整实验方案,谢谢啊

1碱解法小量提取质粒DNA
2 引物的设计和合成
3 PCR扩增目的基因及回收
4 PCR扩增的目的基因、载体的双酶切消化
5 连接反应
6 大肠杆菌感受态细胞的制备
7 转化：
8 重组质粒的鉴定