问题描述：
HPLC法 测黄酮类化合物 波长选择问题
紫外在200-800nm 扫描后 对照品和供试品在254nm 和355nm 均有吸收 请问该如何选择波长 选择254nm 是不是会有末端吸收呢 或者是很多类成分在254下均有吸收代表性不强,还是选355nm 好一点?选择波长的原则是什么呢?
紫外在200-800nm 扫描后 对照品和供试品在254nm 和355nm 均有吸收 请问该如何选择波长 选择254nm 是不是会有末端吸收呢 或者是很多类成分在254下均有吸收代表性不强,还是选355nm 好一点?选择波长的原则是什么呢?
问题解答：
我来补答
如果是定量,看你所测含量的化合物在哪个波长有最大吸收波长,一般是选最大吸收波长的那个.但是如果是定性,最好选有很多峰的.
末端吸收是看什么流动相,甲醇末端吸收在210nm,乙腈的在190nm.
再问： 谢谢你 是定量的 在254nm 下有最大吸收 但是文献选择该波长的不多 反而都是在360nm 左右 是不是考虑在254nm下吸收的物质种类多啊 1为355nm 2为254nm 应该选择哪一个？
再答： 这种情况，应该都可以。但考虑到是定量，要保证良好的分离度和好看的峰形以及各峰的位置。文献中采取360nm，应该在该波长下，样品中的杂志较少被检查到。 你可以用样品代替标准品，做一下紫外扫描，这样就可以直接选择了。
再问： 谢谢您的回答 样品也做过紫外扫描了 和这个图谱类似 也是这两个锋 还是选择355nm 好一点吧？
再答： 嗯 可以
末端吸收是看什么流动相,甲醇末端吸收在210nm,乙腈的在190nm.
再问： 谢谢你 是定量的 在254nm 下有最大吸收 但是文献选择该波长的不多 反而都是在360nm 左右 是不是考虑在254nm下吸收的物质种类多啊 1为355nm 2为254nm 应该选择哪一个？
再答： 这种情况，应该都可以。但考虑到是定量，要保证良好的分离度和好看的峰形以及各峰的位置。文献中采取360nm，应该在该波长下，样品中的杂志较少被检查到。 你可以用样品代替标准品，做一下紫外扫描，这样就可以直接选择了。
再问： 谢谢您的回答 样品也做过紫外扫描了 和这个图谱类似 也是这两个锋 还是选择355nm 好一点吧？
再答： 嗯 可以
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