植物组织中淀粉含量的测定
【原理】 淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用苯酚或蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定.【仪器与用具】电子天平；容量瓶：100ml×4,50ml×2；漏斗；小试管若干支；电炉；刻度吸管0
【原理】
淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用苯酚或蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定.
【仪器与用具】
电子天平；容量瓶：100ml×4,50ml×2；漏斗；小试管若干支；电炉；刻度吸管0.5ml×1,2.0ml×3,5ml×4；分光光度计；记号笔.
【试剂】
（1）浓硫酸（比重1.84）；
（2）9.2mol/L HClO4；
（3）2%蒽酮试剂：同蒽酮法（或9%苯酚,同方法一）；
（4）淀粉标准液：准确称取100mg纯淀粉,放入100ml容量瓶中,加60～70ml热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸0.5h,冷却后加蒸馏水稀释至刻度,则每ml含淀粉1mg,吸取此液5.0ml,加蒸馏水稀释至50ml,即为每ml含淀粉100μg的标准液.
【方法】
1．标准曲线制作
取小试管11支从0～10编号,按表24-3加入溶液和蒸馏水.
以下步骤按苯酚法或蒽酮法均可,见方法一或方法二,绘制相应的标准曲线.
表24-3 各试管加入标准液和蒸馏水量
管 号
0
2
4
6
8
10
淀粉标准液(ml)
0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
蒸 馏 水（ml）
2.0
1.6
1.2
0.8
0.4
0
淀粉含量（mg）
0
40
80
120
160
200
2．样品提取
将提取可溶性糖以后的残渣,移入50ml容量瓶中,加20ml热蒸馏水,放入沸水浴中煮沸15min,再加入9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷却后,混匀,用滤纸过滤,并用蒸馏水定容（或以2500r/min离心10min）.
3．测定 可采用苯酚法或蒽酮显色法测定.
按下式计算淀粉的含量.淀粉水解时,在单糖残基上加了1分子水,因而计算时所得的糖量乘以0.9才为扣除加入水量后的实际淀粉含量.
淀粉含量（%）=
式中 C－标准曲线查得的淀粉含量（μg）；
V－提取液总量（ml）；
a－显色时取液量（ml）；
W－样品重（g）.
注：淀粉水解完全度试验 样品测定中可同时作1份用于淀粉水解完全度检验的样品,在酸解过滤后,将其残渣加上2ml水,搅拌均匀,吸2滴于白瓷盘上,加2滴I2-KI溶液,显微镜下观察,若出现紫蓝色颗粒,证明水解不完全,其正式测试样品需再加高氯酸水解,直至不出现蓝紫色为止.
