测序结果怎么找不到我的扩增引物序列?

测序结果怎么找不到我的扩增引物序列?
可以排除酶切位点距离测序引物太近\不可分辨的原因;同时我也通过互补链查找了,仍没有发现
我的引物是通过PP5.0设计的,交由上海生工合成的(附带完整的合成报告单)
酶切位点是载体自带的涂bamh1等。
我用pcr产物直接连接t载体，之后转染大肠杆菌，直接送大肠杆菌至公司测序