如果一个蛋白和前一个蛋白融合表达的时候,后面一个蛋白的翻译还必须有ATG吗?

不用的.
既然是融合表达,那么是作为一个蛋白进行表达的.如果在两段序列中再加入一个ATG,那么它只会作为甲硫氨酸进行翻译的.如果两端序列各有一套起始终止,那是作为两个蛋白进行翻译的.