问题描述：
关于平末端DNA加A的一些问题~
刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：
1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~
2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果好,还是PCR后,再加效果好~
3.如何鉴定是不是加A尾成功了?有没什么方法做个阳性对照?
4.要不要加A尾成功了,再进行一次纯化,然后再连接载体呢?
刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问：
1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~
2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果好,还是PCR后,再加效果好~
3.如何鉴定是不是加A尾成功了?有没什么方法做个阳性对照?
4.要不要加A尾成功了,再进行一次纯化,然后再连接载体呢?
问题解答：
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