做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊?

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做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊?
1个回答 分类:生物 2014-11-13

问题解答:

我来补答
内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都要做,跑出的条带进行灰度分析,用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量.你可以去生物帮那里了解.那里面向生物研究者、企业和研究机构,提供最新、领先、精准、高效、全面的生物产品和技术信息.1.物种:拟南芥(arabidopsis)或maize 2.基因名称:18S rRNA 3.模板:cDNA 4.PCR类型及目的:RT-PCR 5.Forward primer (5’-3’):CCATAAACGATGCCGGA Reverse primer (5’-3’):CACCACCCATAGAATCAAGA Probe:无 6.产物长度(bp):350 7.引物浓度:50 pmol/ul 8.退火温度:54.1 9.所用仪器:PE-9600 10.提交者ID:yuxing955 11.参考文献原文:本人亲自验证,还有本实验室其他人亲自验证.please click to connect www.bio1000.com/zt/dna/225764.html .hope that i can help you 1.物种:maize 2.基因名称:actin 3.模板:cDNA 4.PCR类型及目的:RT-PCR 5.Forward primer (5’-3’):AAATGACGCAGATTATGTTTGA Reverse primer (5’-3’):GCTCGTAGTGAGGGAGTACC Probe:无 6.产物长度(bp):7.引物浓度:50 pmol/ul 8.退火温度:54.1 9.所用仪器:PE-9600 10.提交者ID:yuxing955 11.参考文献原文:本人亲自验证,还有本实验室其他人亲自验证 你可以去生物帮自己查找一下啊,
 
 
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