Annexin Ⅴ-FITC/PI能否用于测定细胞周期

Annexin V-FITC/PI是用来测细胞凋亡的,测细胞周期可以用其中的PI,但用Annexin V-FITC/PI来测细胞周期比较浪费试剂.
测细胞周期的大致步骤如下：
1.收集1 x106个细胞,1500rpm离心5 min,弃上清.同样离心条件下,用4℃预冷的PBS洗细胞两次.
2.完全去除上清,加入-20℃预冷的70%乙醇1 ml,立即充分混匀,于4℃固定过夜或-20℃长期固定（可保存数周）.
3.细胞染色
1500rpm离心5 min,弃上清,以1 ml PBS洗涤细胞2次.用100 μl 1 mg/ml的RNase溶液重悬细胞,37℃水浴30 min.加入150 μl 50 μg/ml的PI染色液,混匀后室温避光染色30 min.
4.流式分析
以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数3万个细胞,分析结果.