问题描述： pcr 引物特异性不好怎么办 1个回答 分类：生物 2014-12-12 问题解答： 我来补答 先blast一下,引物特异性不好再改变条件也没意义引物GC% 5‘端或中间高3’低,3’端5个碱基内尽量不要有连在一起的CG且少于3个.引物不要在串联重复区,比如Alu上如果引物没有问题,可以减少引物浓度（100nM),酶的的用量(1U/50ul),增加模板和提高退火温度退火温度最好在设计时统一,这样实验更方便,一般pp5上tm55度可以60度退火,上下游引物tm不要差的太多 展开全文阅读
