原核生物的蛋白质生物合成
氨基酸在核糖体上缩合成多肽链是通过核糖体循环而实现的.此循环可分为肽链合成的起始(intiation),肽链的延伸(elongation)和肽链合成的终止(termination)三个主要过程.原核细胞的蛋白质合成过程以E.coli细胞为例.
肽链合成的起始
1.三元复合物(trimer complex)的形成核糖体30S小亚基附着于mRNA的起始信号部位,该结合反应是由起始因子3(IF3)介导的,另外有Mg2+的参与.故形成IF3-30S亚基-mRNA三元复合物.
2.30S前起始复合物(30S pre-initiation complex)的形成在起始因子2(IF2)的作用下,甲酰蛋氨酸-起始型tRNA(fMet-tRNA Met)与mRNA分子中的起始密码子(AUG或GUG)相结合,即密码子与反密码子相互反应.同时IF3从三元复合物脱落,形成30S前起始复合物,即IF2-30S亚基-mRNA-fMet-tRNAMef复合物.此步亦需要fGTP和Mg2+参与.
3.70S起始复合物(70S initiation complex)形成.50S亚基与上述的30S前起始复合物结合,同时IF2脱落,形成70S起始复合物,即30S亚基-mRNA-50S亚基-fMer-tRNA Met复合物.此时fMet-tRNA Met占据着50S亚基的肽酰位(peptidyl site,简称为P位或给位),而50S的氨基酰位(aminoacyl site,简称为A位或受位)暂为空位.
原核细胞蛋白质合成的起始过程氨基酸活化(fMet-tRNAMet形成)
关于原核细胞蛋白质生物合成的起始过程讨论以下几点:
1.核糖体亚基(30S和50S):70S核糖体颗粒必须解离为亚基,才能参与形成30S前起始复合物及70S起始复合物,IF3除具有形成三元复合物活性外,也具有使70S核糖体颗粒解离为30S和50S亚基的作用,即解离因子活性(disassociation factor activity).
2.IF:用高浓度的盐(如0.5mol/LKCl)洗涤核糖体,可使核糖体解离为亚基,但这些核糖体亚基在蛋白质生物合成的起始阶段没有活性.后来从盐洗涤液中分离出三种蛋白质因子,当把这三种因子加入盐洗过的核糖体后,核糖体再现了活性,故将这三种蛋白质因子依次命名为IF1、IF2和IF3.在70S起始复合物形成后,无任何IF与之结合.IF的生物学活性见下表.值得一提的是IF1无特异功能,仅具有加强IF2和IF3的活性作用,这种广泛的效应亦称为基因多效性.