问题描述： 急,如何构建原核表达载体 1个回答 分类：生物 2014-11-01 问题解答： 我来补答 大体分为一下几步：1.设计目的片段引物（含限制性酶切位点,要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）2.PCR扩增片段3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接,通过蓝白斑筛选,提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切,回收目的片段4.目的片段与表达载体连接5.转化到DH5a等克隆菌株,通过抗生素筛选,鉴定表达重组质粒.6.测序检测7.正确的表达重组质粒再转到表达菌株8.表达 展开全文阅读
