WB杂带的问题,出现两条带,还有就是只有一条带,但与对照组不在一条线上?出现两条带是非常正常的现象

出现两条带是非常正常的现象.
抗体的原因：不同厂家的抗体特异性会出现不同的差异,大部分都能检测到目的条带,但是有时能检测到非特异性的条带；
蛋白亚型表达的原因：我做了大概两年半的WB,经常会发现,一种蛋白有时检测压型很明显,有时不是很明显.参考了很多文献的结果,均有此种情况出现,即使是大家都觉得很确定的蛋白很多时候也会出现不同的亚型.毕竟对很多蛋白我们的认识有限.这种情况不要怕的,尽管按照真实结果去处理,千万不要为了让结果好看或者符合大家的意思而去做修改.
3.实验技术的原因：曝光的时候会有底片轻微移动的现象,出现很接近的两条.
4.目的蛋白部分降解,也可能会出现相近的两条带.如何去掉杂带?我觉得你先找找你的目的蛋白的分子量,这样就能分辨出那个条带是你像要的.尽量减少蛋白的降解在样品的处理过程中.
杂带：若是多克隆抗体或是抗体浓度过高就可能有杂带.但是目的条带也会在其中,除非你的样品中靶蛋白表达过低才会出现没有目的条带的情况,封闭时间不够也可能出现杂带
总之,只要目的条带有出现,或者在附近都是没有问题的.此外,还可以再做mRNA进一步验证.祝您实验顺利.