Mg2+离子浓度影响PCR扩增效率的机制?

问题描述:

Mg2+离子浓度影响PCR扩增效率的机制?
为什么浓度过高降低pcr扩增特异性,浓度过低影响PCR扩增产量?
1个回答 分类:生物 2014-11-12

问题解答:

我来补答
因为Mg2+是DNA聚合酶(Taq聚合酶)的必需激活剂!
Mg2+浓度越高,聚合酶活性越强,过强就会出现非特异性扩增!
Mg2+浓度越低,聚合酶活性越低,扩增效率也就越低,产物就越少!
所以PCR扩增实验,需要根据实际情况,摸索适宜的Mg2+浓度!
再问: 那为什么聚合酶活性过强会出现非特异性扩增,非特异性扩增是怎么回事呢?
再答: 非特异性扩增,就是随机扩增,扩增的不是目的DNA片段! 活性强,就容易与模板随机结合,导致非特异性扩增! 特异性性扩增,就是只扩增出目的DNA片段!
再问: 那么就是说dNTP会与模板随机的结合了?
再答: 是的!
 
 
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