使用BAEE检测胰蛋白酶活性

胰蛋白酶的水溶液在pH3时最稳定,故用盐酸液（0.001mol/L）配制,在pH7.6-8.8时酶活性最高,故酶解时以磷酸盐缓冲液（pH7.6）进行控制.至于为什么空白和实验组在253nm处都显示over,那就不清楚了.胰蛋白酶专一性地作用于赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的羧基组成的肽键、酰胺键及酯键,其水解速率：酯键＞酰胺键＞肽键.采用专属性较高的合成底物：N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）,在胰蛋白酶的作用下,底物被水解成苯酰酯-L-精氨酸,在253nm处的吸收度随酶促反应时间递增.