在实验室如何做酪蛋白的水解

问题描述:

在实验室如何做酪蛋白的水解
酪蛋白 胰蛋白酶 如何水解酪蛋白获得氨基酸 多肽
1个回答 分类:生物 2014-12-07

问题解答:

我来补答
水解酪蛋白获得氨基酸:
胰蛋白酶液:称取胰蛋白酶1g,用pH=7.0 0.2mol/L磷酸缓冲液100ml完全溶解,过滤,备用.
酪蛋白溶液:称取酪蛋白1g,置于试管中,加适量1mol/LNaOH溶液,置于酒精灯上小心加热直至酪蛋白完全溶解.过滤,定容至100ml.(用该法需要控制好火,否则容易使将酪蛋白烧焦.实际操作时也可以用磁粒旋转仪选择适当温度和转速进行溶解.)
然后将酶稀释100倍,将酪蛋白溶液10倍时测分光度较准确.(当时我们测米氏常数,实验后觉得这样比较好.不知道你做什么,或许这样的浓度也能适合你的实验.)
酶液、底物混匀后,置40℃恒温水浴保温5min.
加10%三氯乙酸溶液、混匀、置40℃恒温水浴保温10min,过滤、定容.
水解成多肽就不知道是怎么做了.我想可能把反应时间缩短成1min甚至更少或许能行.
 
 
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