问题描述： 载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料 1个回答 分类：生物 2014-10-13 问题解答： 我来补答 我汗 你这没个师兄师姐啥的么质粒你自己买或者找别的实验室要去.目的基因的引物设计用primer premier5酶切位点和保护碱基自己去查首先用PCR从cDNA里面把你的目的基因扩增出来 然后跑琼脂糖胶回收 然后做酶切 切多久根据酶不同 把质粒载体也用相同的酶做酶切 然后两个都跑胶回收 然后用T4 DNA连接酶进行16度过夜连接 然后做转化 先把连接产物加到感受态的菌里面 冰上放30分钟 然后42度90秒 再冰上2分钟 然后涂板 展开全文阅读
