这幅画完成后,端庄美丽的蒙娜丽莎脸上那神秘的微笑使无数人为之倾倒.人们对那微笑进行了种种猜测：是和蔼可亲的温婉的微笑?是多愁善感的感伤的微笑?是内在的快乐的标志?是处女的童贞的表现?那微笑仿佛是这一切,又仿佛不是这一切.它的诱人之处,全在于那微笑的神秘莫测和令人倾倒.
后即以“蒙娜丽莎的微笑”喻指迷人的微笑或神秘莫测的微笑.
500年来,人们一直对《蒙娜丽莎》神秘的微笑莫衷一是.不同的观者或在不同的时间去看,感受似乎都不同.有时觉得她笑得舒畅温柔,有时又显得严肃,有时像是略含哀伤,有时甚至显出讥嘲和揶揄.在一幅画中,光线的变化不能像在雕塑中产生那样大的差别.但在蒙娜丽莎的脸上,微暗的阴影时隐时现,为她的双眼与唇部披上了一层面纱.而人的笑容主要表现在眼角和嘴角上,达·芬奇却偏把这些部位画得若隐若现,没有明确的界线,因此才会有这令人捉摸不定的“神秘的微笑”.
