C吧!
原生动物是动物界中最原始的类群.在各种原生动物中,中学生比较熟悉的是草履虫和变形虫.本文介绍这两类动物的采集和培养方法.
一、草履虫（Paramecium）
草履虫属于原生动物门的纤毛纲,是一类体型较大的原生动物,在自然界广泛分布,又容易采集和培养,是观察研究原生动物的好材料.草履虫种类很多,其中体型最大和最常见的是大草履虫（Paramecium caudatum）.
1.采集
草履虫通常生活在水流速度不大的水沟、池塘和稻田中,大多积聚在有机质了丰富,光线充足的水面附近.当水温在14～22℃时,繁殖最旺盛,数目最多、草履虫的这些习性,是确定采集地点和方法的重要依据.
(1)到水沟、池塘采集草履虫.水沟和池塘是草履虫的主要生活场所.在气候温暖的季节,到水质没有污染的水沟、池塘岸边,选择枯枝落叶多的地方,用广口瓶沿水面采集池水,这样的池水往往含有许多草履虫.为了更有把握,可在不同地点多采几瓶.采集后,广口瓶内要放置少许水草,瓶口不要加盖,以免草履虫因缺氧而窒息死亡.
回到实验室后,要把盛有池水的广口瓶放在温暖、明亮、阳光又不直射的地方,使瓶中的革履虫迅速繁殖.三五天以后,对着光线用肉眼观察,如果看到水中有许多小白点在不停地游动,很可能就是草履虫.这时,用吸管吸取一滴带有小白点的水,放在载玻片上,用显微镜进行观察,在视野中会看到各种微小生物.如果发现有象倒置的草鞋一样的小动物,不停地螺旋运动,那就是草履虫,采集就成功了.
(2)到稻田采集草履虫.在稻田灌水期间,寻找田中的旧稻茬,用广口瓶在稻茬附近取水,随后放进几根旧稻草.这样的水中往往会有许多草履虫.返回实验室后,放在温暖明亮处,三五天后,用显微镜检查是否有草履虫存在.
(3)从新鲜稻草上采集草履虫.当环境变得干旱或寒冷时,草履虫能向身体表面分泌一层蛋白质的薄膜,虫体不吃不动,进入休眠状态.这种状态叫作包囊.在稻田水抽干时,草履虫便形成许多包囊,附着在稻草近根部的几节茎上.因此,可选取新鲜稻草近根部的几节,剪成3～4厘米长的小段,放入广口瓶中,注入清水,放在明亮温暖处,一周以后,用显微镜检查是否有草履虫.
2.配制培养液
草履虫的食物主要是细菌.为了培养繁殖草履虫,必须配制含有大量细菌的培养液.培养液的配制方法通常有以下两种.
(1)稻草培养液.取新鲜洁净的稻草,去掉上端和基部的几节,将中部稻茎剪成3～4厘米长的小段,按1克稻草加清水100毫升的比例,将稻草和清水放入大烧杯中,加热煮沸10～15分钟,当液体呈现黄褐色时停止加热.这样的液体,由于加热煮沸,只留下了细菌芽孢,其它生物已均被杀死,为培养草履虫创造了良好条件.为了防止空气中其它原生动物的包囊落入和蚊虫产卵,烧杯口要用双层纱布包严.然后放置在温暖明亮处进行细菌繁殖.
经过3～4天,稻草中的枯草杆菌的芽孢开始萌发,并依靠稻草液中的丰富养料迅速繁殖,液体逐渐混浊,等到大量细菌在液体表面形成了一层灰白色薄膜时,稻草培养液便制成了.由于草履虫喜欢微碱性环境,如果培养液呈酸性,可用1％碳酸氢钠调至微碱性,但pH值不能大于7.5.
(2)麦粒培养液.将5克麦粒（大麦、小麦均可）放入1000毫升清水中,加热煮沸,煮到麦粒胀大裂开为止.然后在温暖明亮处放置3～4天,便制成了麦粒培养液,此时培养液中已繁殖有大量的细菌.
3.接种
接种是指将采集来的草履虫转移到培养液的过程.接种草履虫时必须提纯,否则会混入其它小动物.这不但会影响草履虫的纯度,而且一旦混入草履虫的天敌水轮虫（Rotaria）,将会使培养液中草履虫的数量急剧下降.
接种时,先将含有草履虫的水液吸到表面皿中,再将表面皿置于低倍显微镜或解剖镜下检查,发现有草履虫后,用口径不大于0.2毫米的微吸管,将表面皿中草履虫逐个吸出,接种到培养液的广口瓶中进行繁殖.
如果要培养纯系的草履虫,可按上述方法,在显微镜或解剖镜下,从表面皿中吸出一个草履虫,放入盛有少量培养液的凹玻片中,上面再覆盖一片凹玻片,用以防止培养液干燥.待草履虫经过横分裂达到20～30个个体时,移到培养液的广口瓶中进行繁殖.
4.培养
(1)将接种有草履虫的培养液的广口瓶,放在温暖明亮处进行培养,培养液的容器口要用纱布包严.大约1周后,就会有大量草履虫出现.
(2)如果是长期培养,就要定期更新培养液.这是因为随着虫体大量繁殖,培养液中营养逐渐减少,而虫体排出代谢物却又不断增加,这就会引起草履虫数量减少甚至全部死亡.因此在培养过程中,每隔3天左右须更新一次培养液.更新时,用吸管从广口瓶底部吸去培养液及沉淀物,每次要吸去一半培养液,加入等量新鲜培养液.这样可使草履虫长期得到保存.
5.观察
在显微镜下,草履虫游动迅速,难以观察,可用以下方法限制和减缓其运动：将少量棉花纤维放在载玻片上,滴上草履虫培养液,盖上盖玻片,先在低倍镜下观察,如果草履虫还在游动,可再用一条吸水纸在盖玻片的一侧吸去一些水分,直至容易观察为止.也可将少量蛋清固定剂涂在载玻片上,然后滴上一滴草履虫培养液,待水略干时进行观察.蛋清固定剂的制作方法是将蛋清搅匀,加入等量甘油混合即成.
(1)观察草履虫的形态结构.在显微镜下,观察草履虫以下形态结构：
①分辨虫体的前端和后端.前端较圆,后端较尖.体长约0.15～0.30毫米.
②表膜.为虫体最外一层具弹性的膜,表膜上密生纤毛.
③细胞质.分为外质和内质两部分.外质在表膜下方,薄而透明,内质在外质之内,多颗粒,流动性.
④口沟、胞口和胞咽.口沟是虫体前侧斜行的一条纵沟,胞口为口沟底部的小孔,胞咽在胞口之下,是一条漏斗形的弯管.胞咽内有颤动的纤毛,具输送食物的功能.
⑤食物泡.食物进入胞咽以后被原生质包围形成食物泡,然后进入内质中环流.可以沿盖玻片的一侧,滴入一滴墨汁,可以看到墨汁颗粒进入虫体内形成食物泡的过程和在体内环流情况.
⑥伸缩泡.在身体前后各有一个,每个伸缩泡周围有6～7收集管.要仔细观察伸缩泡与收集管的收缩有何规律.
⑦刺丝泡.刺丝泡是一丝椭圆形的小囊,位手表膜下的外质内,排列整齐.如果在盖玻片的一侧滴入一滴1％碘液,可以见到有细长的刺丝放出.
⑧细胞核.草履虫有两个细胞核,一大一小,在活体上不易看到.可在盖玻片的一侧滴入一滴5％冰醋酸,2～3分钟后,能清楚地看到肾形的大核和在大核中部凹处的圆形小核.
(2)观察虫体运动.将显微镜的光线调暗一些,可见到虫体体表覆有纤毛,纤毛不停地摆动,特别是口沟处的纤毛摆动得更有力,使得虫体螺旋形前进或后退.
(3)观察草履虫的生殖,包括无性生殖和有性生殖.
①无性生殖.用普通吸管吸取有草履虫的培养液,放到载玻片上,当看到有草履虫时,另取一支微吸管,从中吸出1～2个身体胀大的草履虫,转到另一片载玻片上,并加几滴没有草履虫的培养液.为了防止波滴蒸发,可将载玻片放入培养皿中,事先在培养皿的底层铺上潮湿的脱脂棉,并在棉花上横放两根短玻璃棒,玻璃棒上放置载玻片,最后盖好培养皿.这样就做成了一个全湿环境,能使载玻片的液滴,保持几天不干.
将上述装置放在温暖处培养,每隔1～2小时用显微镜观察一次,可以看到虫体用横分裂进行无性生殖的情况.草履虫进行无性生殖时,细胞延长,中部向内凹入,大小核各一分为二,最后横向形成两个草履虫.
②有性生殖.草履虫的有性生殖是接合生殖.为了能见到接合生殖,可将草履虫培养液用离心器浓集,吸出草履虫放入培养皿中,加入10～15倍清水,置于暗处12小时后,可见到10～30％的草履虫,在进行接合生殖.接合生殖时,两个虫体的口沟紧贴在一起,此时,彼此的大核往往消失.
二、变形虫（Amoeba）
变形虫属于原生动物门的肉足纲,种类很多,在淡水中常见的种类主要有大变形虫（Amoeba proteus）.变形虫大多生活在水质比较清、藻类和细菌比较多的浅池、沟渠、水田等环境里.
1.采集
(1)从水中腐烂植物上采集.夏秋之际,在浅池、沟渠中,常有许多腐烂植物.它们或浮于水面,或沉落在水中.这些腐烂植物的表面是变形虫生活繁殖的好场所,常常有许多体形较大的变形虫.采集这种腐烂植物放入广口瓶中,注入适当池水,带回实验室内从腐烂植物表面刮取粘稠物,制作临时装片,放在显微镜下检查.如果在视野中看到一些半透明、半流动、四周界限分明、象油滴似的颗粒状东西,这就是变形虫.
(2)到含有硅藻的池水里采集.变形虫喜食硅藻,含有硅藻的池水常呈黄褐色,并且近岸边水的表面常有许多黄褐色泡沫,其中除硅藻外,往往有许多正在吞噬硅藻的变形虫.可以用广口瓶盛取带有泡沫的池水,带回室内进行镜检.
(3)从新鲜稻草或野草上采集.变形虫在环境恶劣时,能形成休眠的包囊.因此在新鲜稻草和一些水边野草茎的下部,常附有变形虫的包囊.将这种稻草或野草,浸落在盛有池水的培养缸中,放在温暖光亮地方,1～2星期后,水面上形成一层由枯草杆菌密集而成的焦黄色薄膜,其中往往有由包囊萌成的变形虫,而且数量往往很多.
2.分离
变形虫在环境突然改变的时候,有牢牢附在物体上的习性.利用这一习性,在显微镜下找到变形虫以后,将载有变形虫的载玻片稍微振动一下.然后使载波片倾斜,用水缓缓冲洗几分钟,再放回显微镜下观察,可以看到其它水生动物都已被冲走,只有变形虫一动不动地紧贴在载玻片上,从而达到了分离变形虫的目的.
3.配制培养液
变形虫的培养液有稻草培养液、麦粒培养液和大米培养液等.前两种培养液的配制原理和方法,与草履虫的培养液相同.大米培养液是按100毫升水加入3～4粒大米的比例配制而成的,这种培养液常能产生大量的无色鞭毛虫,供变形虫食用.
4.培养
将上述经过分离、只有变形虫的载玻片放入培养液里,盛装培养液的容器口要用纱布包严,放在温暖明亮处,大约经过半个月的培养,就会繁殖出大量的变形虫来.
5.观察
用镊子从稻草培养液中取出一根草段,或从麦粒培养液、大米培养液中取出一颗麦粒或米粒,在载玻片上轻轻涂抹几下,再滴加少量培养液,放在显微镜下,使视野光线变暗,就会找到变形虫.
找到变形虫后,换高倍物镜进行观察,仔细观察变形虫的运动方式、取食方式,在结构方面要辨认其身体的外质和内质,以及内质中的食物泡和伸缩泡.如果用甲基绿染色,可以看到被染成绿色的细胞核
