在real-time PCR中如何检测DNA污染

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在real-time PCR中如何检测DNA污染
1个回答 分类:生物 2014-11-26

问题解答:

我来补答
既然把DNA叫做污染,那应该是对RNA反转录后进行Real-time了.
你用未进行反转录的RNA作为模板,跑一次检测Real-time.如果没有DNA污染,这次RT是不会得到扩增结果的,因为RNA不能作为普通Taq酶的模板;一旦RNA样品里面有DNA污染,那检测RT出现扩增产物的可能性非常高.
只要RNA作为模板的Real-time PCR得到了扩增结果,那就是存在DNA污染.
PCR产物的融解曲线必须做,而且你也必须得知道这对引物二聚体的融解峰,防止引物二聚体误导结果.
 
 
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