基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应.已经知道有许多重要的核酸酶,如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等,在基因工程的操作中有着广泛的用途.\x0d1.限制性内切核酸酶\x0d限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并在合适的条件下使每一条链一定位点上的磷酸二酯键断开,产生具有3/—OH基团和5/—P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶(endo-deoxyribonuclease).至今发现的限制性内切核酸酶有I型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶,它们各具特性.基因工程中所说的限制性内切核酸酶都是指Ⅱ型酶.\x0d限制性内切核酸酶把目的基因从只有四种碱基A、T、G、C组成的DNA长链(人类DNA长度为3X109个碱基对)中准确地剪切下来.每一种限制性内切核酸酶的识别位点是固定的,如EcoRI的识别位点是GAATTC及其互补序列CTTAAG.\x0d………………
