问题描述:
用大肠杆菌表达蛋白时,要确定是上清还是包涵体表达,为什么沉淀里的包涵体不需要用尿素溶解就可以跑电泳
我不明白这段话中的一些意思:
“先破碎细胞,离心,沉淀和上清分别跑电泳,看看目的蛋白在包涵体中还是在裂解上清中.若在包涵体中,先洗涤包涵体,然后再用8M尿素或者6M盐酸胍溶解包涵体.”
主要想问,为什么用沉淀跑电泳可以确定目的蛋白是否在包涵体中呢?包涵体不是要溶解的吗,不溶解的话质量应该很大吧(因为包涵体里有很多蛋白),质量大的话怎么可以用电泳来确定呢?电泳的原理就是根据蛋白质量大小来将不同的蛋白分开的呀?
首先,我知道什么是包涵体。第二,我没有说质量大不可以跑电泳。第三,我知道不同种电泳的原理各不相同。我对生物技术算不上十分精通,但这点常识还是有的。
我只想问,第三点中说“上样之前,需要用上样缓冲液处理样品,处理后,包涵体也就解聚了”,为什么上样缓冲液可以让包涵体解聚?
我不明白这段话中的一些意思:
“先破碎细胞,离心,沉淀和上清分别跑电泳,看看目的蛋白在包涵体中还是在裂解上清中.若在包涵体中,先洗涤包涵体,然后再用8M尿素或者6M盐酸胍溶解包涵体.”
主要想问,为什么用沉淀跑电泳可以确定目的蛋白是否在包涵体中呢?包涵体不是要溶解的吗,不溶解的话质量应该很大吧(因为包涵体里有很多蛋白),质量大的话怎么可以用电泳来确定呢?电泳的原理就是根据蛋白质量大小来将不同的蛋白分开的呀?
首先,我知道什么是包涵体。第二,我没有说质量大不可以跑电泳。第三,我知道不同种电泳的原理各不相同。我对生物技术算不上十分精通,但这点常识还是有的。
我只想问,第三点中说“上样之前,需要用上样缓冲液处理样品,处理后,包涵体也就解聚了”,为什么上样缓冲液可以让包涵体解聚?
问题解答:
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