对基因片段进行测序的目的,以及直接测序和克隆测序的区别和适用条件!基础有点薄弱,谢谢赐教!

问题太多了,不知道从何答起啊
测序的目的就不用说了吧,无非就是想知道这段序列到底是什么,是不是我想要的序列,是不是想序列；
直接测序是指：用PCR产物直接测序；PCR产物直接测序有两大优点∶一是操作易于标准化与自动化,因为它是一个单一的酶的反应过程,不依赖于生物体；二是通过一次测序反应就能确定样品中某个等位基因的顺序,而PCR产物克隆后测序时,样品顺序要在测定了数个克隆片段之后才能确定.因为只有这样,才能区别突变是基因组本来就有的,还是由于Tag聚合酶在PCR过程中错误掺入核苷酸引起的.
克隆测序是指：将你要测序的片段插入到克隆载体中,获取还有待测片段的质粒,然后直接送测序公司测序 .
二者适用的方面：如果你只是要部分序列,直接进行PCR,产物送测序公司测序；如果你要得到全长序列,就把PCR产物进行TA克隆,将阳性菌液或者自己提取质粒然后送测序公司测序或者自己把质粒PCR后再交给测序公司测序.