在制备培养基时,通常要考虑以下因素：
(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好.尽管各细胞株之间细胞生长最佳pH值变化很小,但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.7.7最 好,转化细胞以pH=7.7.4更合适.据报道,上皮细胞以pH=5.5合适.为确定最佳pH值,最好做一个简单的生长实验或特殊功能分析.
酚红常用作指示剂,pH=7.4呈红色,pH=7.0变橙色,pH=6.5变黄色,而pH=7.6呈红色中略带蓝色,pH=7.8呈紫色.由于对颜色的观 察有很大的主观性,因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样,放在与制备培养基相同的瓶子中.
(2)缓冲能力碳酸盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多.在生理pH值条件下的缓冲能力差.
(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定.如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误 差.
(4)粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响,在多数情况下,对细胞生长没有什么影响.在搅拌条件下,用羧 甲基纤维素增加培养基的粘度,可减轻细胞损害.这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要.
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