干扰RNA和反义RNA作用效果上有什么不用?RNA干扰做种起作用的是siRNA对吗?

问题描述:

干扰RNA和反义RNA作用效果上有什么不用?RNA干扰做种起作用的是siRNA对吗?
第一:反义RNA是整条链都和mRNA互补,而反义RNA是讲双链RNA导入细胞后,要切割成siRNA,然后才与mRNA结合,那为什么干扰RNA要比反义RNA的效率高很多呢?
第二:干扰RNA,最终起作用的是siRNA对吧,我看文献构建RNA干扰载体的时候是先获得了很长的正义片段和反义片段之后连接到了载体上,这是要这个连接的片段到细胞内反转录成RNA后自己结合成双链RNA后再被切割成siRNA再发挥作用吗?
如果是的话,那么可不可以直接构建含siRNA的载体呢?
还有构建植物RNA干扰表达载体的时候是怎样根据目的基因的cDNA序列确定干扰序列呢?怎么有的地方说要选19~21nt,而文献上的是几百bp?
问题比较多,辛苦回答者了,您会有福报的!不好意思我没有财富值了~
1个回答 分类:生物 2014-11-02

问题解答:

我来补答
问的乱七八糟的 之前做反义RNA转进去的是单链 稳定性差 效果不太好 至于构建siRNA表达载体 是将siRNA的短片段放在了类似miRNA的骨架之中 这样可以被drosha dicer识别 进而进入RNAi的通路 这样效率更高 如果愿意也可以直接连个短片段进去 就是效率低了点 你要是想做这方面的实验就加我再问吧 懒的多打字了~
再问: 请求加为好友、
 
 
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